构建精准免疫细胞治疗平台
2021-03-07 15:53:09 9 举报
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构建精准免疫细胞治疗平台
作者其他创作
大纲/内容
确认表达TCR受体的T细胞可识别特异性蛋白
qRT-PCR检测癌细胞及正常细胞中miRNAs表达
负载突变肽段的DC
构建CARL6慢病毒质粒载体
CARL6-T细胞构建
溶瘤病毒疫苗OVV-01
疗效及安全性评估
针对癌症患者标本进行全外显子测序及亲和力分析，筛选并建立多癌种特异性抗原库
基因层面
单细胞克隆稀释法
T细胞分选/激活
特异抗原靶点
慢病毒载体包装以及滴度检测
构建逆转录病毒MSCG-1载体
突变TCR恒定区
筛选特异性靶点TM4SF1
体外实验：CCK8检测TCR-T细胞对靶细胞的杀伤力
免疫组化检测
CARL6-T细胞多种细胞因子分泌检测
TCR-T/CAR-T扩增培养
逆转录/慢病毒感染
符合标准患者入组
胰腺癌标本质谱分析
microRNA的高通量筛选癌组织和癌旁组织中差异表达量
蛋白层面
体内实验：构建胰腺癌PDX模型小鼠，检测特异性TCR-T功能
FCM
构建精准免疫细胞治疗平台
TCR-T体系建立并开展单独/联合OVV-01临床研究
Western blot检测
转染突变RNA的DC
免疫细胞制备工艺以及临床研究经验
CARL6-T体系建立并开展临床研究
患者筛选
体外实验：CCK8检测CARL6-T细胞对靶细胞的杀伤力
TCR-T细胞构建
筛选识别胰腺癌中特异表达蛋白的TCR受体
CARL6-T细胞表型检测
特异血清学肿瘤标志物
TCR-T/CAR-T细胞回输
Western blot验证表达
特异的TCR可变区
体内实验：构建NSG移植瘤模型小鼠，检测特异性CARL6-T功能
qRT-PCR检测癌症患者及正常人血清中miRNAs的表达
与胰腺癌组织中的CD4+及CD8+T细胞共培养
确定潜在的癌症血清诊断标志物
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