2技术路线图
2021-11-02 22:07:05 1 举报实验设计技术路线图
作者其他创作
大纲/内容
细胞迁移实验细胞侵袭实验
Tet-on/Dox慢病毒感染
q-PCR检测靶基因转录水平
构建OTUD7B敲除和诱导过表达肿瘤细胞株
分子克隆构建表达载体
恢复KO细胞株中OTUD7B表达，泛素化实验检测catenin泛素水平（同上）
构建蛋白截短体和突变表达载体
统计学分析：卡方检验OTUD7B与临床病理指标相关性；Pearson相关分析OTUD7B与catenin相关性
体内去泛素化实验检测OTUD7B对catenin泛素化水平影响
恢复KO细胞株中OTUD7B表达，WB检测通路相关蛋白（同上）
内源性co-IP
Crispr/Cas9慢病毒感染
CCK8克隆形成实验克隆形成实验
体内泛素化实验检测catenin泛素化水平
整理分析临床病理指标
CHX追踪实验检测OTUD7B对蛋白质稳定性影响
IHC及Western检测蛋白表达水平
明确OTUD7B与catenin蛋白互作关系
体外筛选胰腺癌细胞株（WB）
收集人胰腺癌石蜡标本及新鲜标本
外源性co-IP
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