2生化-核酸
2022-02-06 16:43:29 1 举报AI智能生成
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2生化-核酸
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大纲/内容
核糖
碱基
核苷
β糖苷键
磷酸
核苷酸
核糖核酸ＲＮＡ
核苷酸=戊糖+碱基+磷酸
核苷酸的排列顺序
一级结构
基本单位
1⃣️不同个体DNA碱基组成不同
2⃣️同一个体，有相同碱基
3⃣️对于一特定组织的DNA，其碱基组分不随年龄环境等变化
4⃣️对于一特定生物体：A=T，G三C。总嘌呤=总嘧啶（摩尔数相同）
碱基组成规律（Chargaff规则）
1⃣️两条多聚脱氧核苷酸链组成➕右手螺旋（B-型DNA，Z-型RNA左手螺旋）➕反向平行➕直径2.37nm➕螺距3.54nm
2⃣️外侧（亲水）：脱氧核糖➕磷酸基团；内侧：疏水碱基
3.6个as残基升高一圈
每个螺旋10.5个碱基对
旋转角度36度
垂直距离0.34nm
3⃣️互补碱基对，碱基对平面与螺旋轴垂直
4⃣️碱基堆积力（纵向、碱基对疏水作用力的重叠）和互补链之间碱基对的氢键（横向）共同维持双螺旋稳定，前者更重要
双螺旋结构
脱氧核糖核酸DNA（dAMP，dGMP……）
单链无规则卷曲：只有tRNA有碱基配对
寿命最短（半衰期min），丰度最小，种类最多（长短不一，差别大）
功能：Pr合成模版
内含子：hnRNA中不出现在mRNA中，被转录不被翻译
外显子：保留于mRNA中的片段，被转录也被翻译
有外显子➕内含子，mRNA前体
经剪切修饰➡️成熟mRNA
hnRNA（不均一核RNA）
二者共同负责mRNA从细胞核向胞质的转运
维持mRNA的稳定性
翻译起始的调控
5‘-帽结构，3’-多聚A尾结构
碱基序列决定Pr的as序列
开放阅读框
非翻译序列
结构
mRNA
较稳定，分子量最小，稀有碱基含量最多（均为转录后修饰而成，无遗传密码，构成发夹结构）
功能：转运体
DHU环：识别氨酰tRNA合成酶
反密码环：反密码子碱基互补识别mRNA的密码子
TYC环：识别核蛋白体
氨基酸接纳茎（氨基酸臂）：3‘端连接-CCA-OH，可连接as，生成as-tRNA
反密码子--三叶草-茎环结构（二级结构）
tRNA
含量最多，与核蛋白体蛋白共同组成核蛋白体，作为合成Pr的场所
功能：核糖体组成部分
爱上我，要留下我
原核（三种：5s，16s，23s）：16s➕21种Pr➡️30s小亚基；23s➕5s➕31种蛋白质➡️50s大亚基
我爸是恶霸，打我一巴掌
真核（四种：5s，5.8s，18s，28s）：18s➕33种Pr➡️40s小亚基；28s➕5.8s➕49种Pr➡️60s大亚基
18s
40s
28s、5.8s、5s
60s
真核
16s
30s
23s、5s
50s
原核
5s两者都有
区别
核糖体=rRNA+蛋白质=小亚基+大亚基
rRNA
非编码RNA
RNA
核糖核酸RNA（AMP，UMP…）
空间结构与功能
hnRNA（好男人）既有内含子又有外显子
5种，与多种Pr形成核糖核蛋白颗粒snRNP，参与真核细胞hnRNA加工剪接，促进mRNA成熟
核内snRNA：剪接hnRNA
核仁SnoRNA：剪接rRNA
胞质ScRNA：信号肽
核酸酶：1⃣️所有可以水解核酸的酶2⃣️本质为蛋白质3⃣️分DNA酶和RNA酶
核酶（≠核酸酶）：催化特定RNA降解，参与RNA的剪接修饰，本质为RNA
干扰SiRNA：干扰mRNA形成【外源的】
microRNA：干扰mRNS【内源的】
双链→单链（氢键断裂，结构松散，致使小分子的不对称性变小，故溶液粘度⬇️）
双键暴露，在260nm吸光度⬆️
嘌呤和嘧啶分子未变化，因此最大吸收峰波长不发生转移
增色效应
离子强度⬆️，GC含量⬆️，Tm⬆️
DNA分子越长，Tm⬆️
若DNA是均一的，则Tm值范围小，反之不均一，则范围大
DNA双螺旋，RNA单链，但可形成局部螺旋，所以Tm较高的核算是DNA
Tm解开50%时的温度
氢键的方向垂直长轴
螺距3.54
DNA变性→氢键断裂
煮熟的鸡蛋
280nm
蛋白质沉淀：不一定变性（丙酮）
蛋白质凝固=变性
氢键的方向平行长轴
螺距0.54
蛋白质→空间构象（非共价键、二硫键）
共轭双键
max吸收：260nm
紫外吸收性质
退火，减色反应
复性：解离的互补链重新互补配对
核酸杂交：杂化双链，碱基互补配对原则
DNA复性与核酸杂交
理化性质
核酸
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