15生化-RNA的生物合成(转录)
2022-02-06 16:46:15 0 举报
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生化-RNA的生物合成
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大纲/内容
转录
特点
不对称转录(模板链、编码链)
编码链=转录产物
模版链:能转录生成RNA的核酸链
反意义链
编码链:与模版互补的另一股单链
有意义链
无校对功能→错误较高
不需要引物
转录产物:mRNA,rRNA,tRNA,snRNA,miRNA等
复制和转录
相同点
DNA为模版
方向:5-3
都生成3‘-5’磷酸二酯键
碱基互补配对原则
酶促的核酸聚合反应
以核苷酸为原料
依赖DNA聚合酶
产物为很长的多核苷酸链
不同点
复制两条链为模版,转录一条
复制dNTP,转录NTP
复制依赖DNA的DNApol,
转录依赖DNA的RNApol
复制需引物,转录不需要
复制DNApol有校对功能,错配率低,转录RNApol缺乏校对
RNA无校正
原核生物
RNA聚合酶(1种)
RNA聚合酶α2 β β‘ σ(全酶),具有合成mRNA,tRNA,rRNA功能,无校对功能,缺乏3-5外切酶活性
RNA聚合酶α2 β β‘ (核心酶),参与转录全过程
RNA聚合酶σ:辨认转录起始点,结合启动子
启动子-35区TTGACA
滑到-10区TATAAT
RNA聚合酶α :决定那些基因被转录(转录基因型),与转录频率有关,只参与启动!不参与延长
RNA聚合酶 β:与底物NTP结合,,形成磷酸二酯键,起催化作用
eg.利福平或利福霉素专一性结合β亚基,抑制结核杆菌转录
延长
RNA聚合酶β ’:解开螺旋
启动转录
DNA链上
操纵子:调控序列+多个编码区
乳糖操纵子
启动子:RNA聚合酶和启动子结合
TTGACA
TATAAT:(pribrow盒)
-10区(结合部位)
TATAAT(Pribnow盒)
易解链作为转录模板!,具有高度保守和一致性,β”结合模板的部位
-35区(识别部位)
TTGACA
RNApolσ因子识别序列
转录过程
转录起始
①RNApol识别并结合启动子,形成闭合转录复合体,此时DNA仍保持双链结构。(σ辨认转录起始点-35区,并向10区移动)
②DNA双链打开,闭合转录复合体→开放转录复合体
③第一个磷酸二酯键形成(不需引物)
转录延长
①σ脱落,核心酶参与该过程
②转录产物从5-3延长,新的核苷酸加到3-OH
③转录翻译同时进行,形成转录空泡)羽毛状图形
转录终止
①依赖ρ因子
ρ识别并结合polyC→RNApol构象变化并停顿,ρ中解螺旋酶活性使DNA/RNA杂化双链拆离→转录终止
②非依赖ρ因子
识别RNA的茎环结构和3-端连续的U→转录终止
真核生物
RNA聚合酶
Ⅰ:核仁,45s-rRNA→28S、5.8S,18SrRNA
不敏感
Ⅱ:核浆,hnRNA→mRNA、micRNA
极敏感
Ⅲ:核浆,tRNA、5s-rRNA、snRNA
snRNA:剪接体
敏感
RNApol
转录过程
转录起始
顺式作用原件(转录起始点上游的特异DNA序列)
启动子-25(TATA盒(Hogmers盒),RNA聚合酶结合到DNA的启动子上启动转录)
启动子上游元件(GC盒和CAAT盒)
增强子
转录因子TF/反式作用因子
TFIID结合TATA盒
TFIIA,TFIIB,TFIIE(解螺旋酶)TFIIF,TFIIH(解螺旋酶,催化CTD磷酸化)
TFII最重要
TFII
基本转录因子,参与真核生物mRNA的转录,真核生物进化中高度保守
TFIID 最重要
结合TATA
上游因子
与启动子上游元件结合的蛋白质
Sp1与GC盒结合
C/EBP与CAAT盒结合
PIC(转录起始前复合物)
TFIID,B,A,F,E,H,-RNApolII
转录延长
转录翻译不同时进行
转录终止
转录终止和加尾修饰同时进行
RNA合成后的加工修饰
细胞核中加工
mRNA
5'-加帽
7-甲基鸟嘌呤
m7GTP
使mRNA免遭核酸酶的攻击
3'-加尾
多聚腺苷酸尾poly(A)
维持mRNA作为翻译模板的活性以及增加mRNA本身稳定性的因素
前体mRNA的剪接
去除内含子,连接外显子
内含子:被转录但不被翻译。hnRNA中被剪接去除的核酸序列,不出现在相应mRNA中
外显子:被转录也被翻译。保留在mRNA中的片段
剪接体:内含子剪接场所,由5种核小RNA(snRNA)➕50种Pr
核小核糖体蛋白颗粒(snRNA)👉参与形成小分子核糖核蛋白体
mRNA编辑:对基因的编码序列进行转录后加工
参与切割mRNA:miRNA➕siRNA
rRNA
45SrRNA→18S,5.8S,28S
①5'端:16个核苷酸序列由RNaseP切除
②3端:2个U被RNaseD切除,再加上CCA-OH
③茎环结构:经化学修饰为稀有碱基
④切除内含子
tRNA(含稀有碱基最多)
①切除5'前导序列及内含子
②添加CCA-OH的3'末端
③生成稀有碱基
④化学修饰
甲基化反应
脱氨基反应
核苷酸内转位反应
还原反应
核酶(酶RNA,本质:核酸)
催化性小RNA,催化特定RNA降解的活性,在RNA剪接修饰起作用
不需要Pr也能完成催化(端粒酶需要Pr才可以)
原核生物、真核生物比较
原核:全酶αββ‘δ、起始δ、羽毛
真核:RNA-Ⅱ→hnRNA→mRNA、起始TFⅡD、没有羽毛
RNA合成两种方式
转录:DNA➡️RNA
RNA复制:RNA➡️RNA
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