长链RNA经典流程图
2022-12-20 10:09:38 1 举报六大医学经典技术路线图--长链RNA经典流程图
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大纲/内容
RNA FISH
干扰lncRNA A和miR-B
血栓前状态指标：GPIbα、GPIIb/IIIa水平及PT、APTT
螺旋动脉和微血管变化：观察并计算管腔面积和MVD
双荧光素酶报告实验
绒毛滋养细胞化学缺氧模型
血管内皮细胞损伤指标：血清中sICAM-1、sVCAM-1水平
临床样本：胎盘组织和外周血
表达量检测：明确调控关系
lncRNA A – miR-B - geneE - F通路信号轴
阐明lncRNA A吸附miR-B调控下游靶基因影响滋养细胞生物学行为的分子机制
血压、蛋白尿等指标检测
lncRNA A、miR-B家族、geneC、geneD、geneE等的表达检测
检测miR-B及下游因子表达水平
分组1：Blank、si-NC、si-lncRNA A、Overexpression-NC、Overexpression-lncRNA A
各类因子检测：血小板活化相关因子氧化应激相关因子血管内皮细胞损伤相关因子血管紧张和舒张分子
检测sICAM-1、sVCAM-1水平
生物学行为检测：细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭
阐明lncRNA A吸附miR-B调控geneE影响血小板活化、氧化应激和血管内皮细胞损伤的分子机制
氧化应激指标：MDA含量、SOD、CAT活性、ROS水平
患者血清培养ECV-304细胞
临床相关性分析
筛选出表达差异显著的miR-B家族成员用于后续实验
RNA pull-down
立体注射过表达/沉默 lncRNA A慢病毒载体
双荧光素酶报告实验：MiR-B和geneE结合情况
过表达/敲低miR-B：GeneE、F通路蛋白等表达变化
免疫荧光分析lncRNA A、miR-B、geneE在胎盘组织中的定位
lncRNA A – miR-B - geneC/geneD信号轴
分组2： Blank组、 inhibitor NC组、miR-B inhibitor组、si-NC + miR-B inhibitor组、si-lncRNA A + miR-B inhibitor
明确lncRNA A、米、R-B、geneC等在早发型重度子痫前期中的研究价值
胎盘床滋养细胞浸润情况：观察并计算浸润密度和深度
探究lncRNA A/miR-B信号轴在早发型重度子痫前期进程中的作用
重度子痫前期大鼠模型构建
早发型重度子痫前期患者和相应孕周无并发症孕妇——胎盘和外周血
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