miRNA经典流程
2022-12-20 10:23:38 1 举报
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六大医学经典技术路线图-miRNA经典流程1
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大纲/内容
Hoechst法检测各组细胞凋亡
qRT-PCR检测miR-XX、XX、NF-κB和SP1表达
分析miR-XX与XX、NF-κB含量的相关性，miR-XX与各临床指标参数的相关性
血管内皮细胞功能指标检测：血浆中APC、sICAM-1、v WF检测
整理数据，撰写发表
干扰miR-XX、XX表达及NF-κB通路抑制剂处理
qRT-PCR和Western blot检测：上清液XXPI、TM、PKC、tPA、PAI-1、VCAM-1、ICAM-1、E-选择素等表达
收集患病/高危/正常外周血样本
免疫法检测D-D；其他指标检测（WBC、PLT、MPV、PDW、GMP-140等）
凝固法检测FBG、TT、PT、aPTT等
动物水平上明确miR-XX影响深静脉血栓溶解再通的调控机制
基因芯片筛选血栓中差异性表达的miRNA
血栓前状态分子标志物的检测：ELISA检测血浆中XX、APC、E-选择素等；凝固法检测血浆中AT-III、D-D等;放免法检测血浆中6-Keto-PGF1a和TXB2等
细胞水平上阐明miR-XX直接或间接靶向XX在深静脉血栓中的具体机制
锁定研究对象：miR-XXX
尾静脉注射miR-XX agomir
双荧光素酶实验验证miR-XX与XX的靶向关系
临床上探究miR-XXX与深静脉血栓的相关性
qRT-PCR和Western blot检测：血栓组织中miR-XX、XX、NF-κB、APC、sICAM-1、vWF等表达
qRT-PCR检测三者的表达以明确具体调控关系
在线网站预测与XXX存在结合位点的miRNA
发色底物法检测AT-III、ALT、PAI等
脐静脉内皮细胞（HUVEC）
构建深静脉血栓大鼠模型
选择与凝血机制密切相关的基因XXX
ELISA检测XXX、vWF和t-PA等
miRNP-IP分析miR-XX与XX结合情况
一期凝固法测定总的细胞促凝活性
血栓组织称重，HE染色和透射电镜观察血栓再通情况
单核细胞（THP-1）
MTT法检测细胞增殖
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