YJ抗性消除流程图PPT
2023-03-02 11:00:07 0 举报清晰描述实验各步骤流程
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大纲/内容
取100微升转入5ml LB液体培养基中，置于50℃摇床培养，探索抗性消除效果达到最佳时所需时间
置于水浴锅中加热，探索完全消除营养体时所需的时间和温度
转接于5ml LB+双抗液体培养基，置于37℃摇床活化12小时
分别取500微升于4-6管LB液体培养基中摇床培养，探索最佳摇床温度
转接于含有500-600微升LB液体培养基的EP管中
梯度稀释，探索可清楚观察菌落抗性消除情况的相应梯度
37℃培养JCL16-pTN-CotA-RFP-Cas9，采用LB+双抗固体培养基
定期测量OD值，探索菌落处于旺盛生长期时的OD值范围
分别取100微升涂布于LB、LB+Neo、LB+Erm、LB+Neo+Erm四种固体培养基中，置于50℃培养箱中培养，观察菌落生长情况
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