蛋白质浓度测定
2023-04-16 19:40:30 0 举报
蛋白浓度测定方法的区别
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大纲/内容
蛋白质溶液是否无干扰化合物
是
使用合适的蛋白质标准品,如BSA或IgG;避免使用Bradford法和胺衍生检测法
否
是否存在去污剂,如用于促进蛋白质溶解时
避免使用BCA/Lowry法和CBQCA方法
是否存在螯合剂,如来自于His亲和纯化的EDTA
是否有巯基或者还原剂存在,如来自于GST亲和纯化的DTT
蛋白质/多肽样品分子质量是否大于8 kDa,是否含有多个酪氨酸/色氨酸
在蛋白质稀释液中是否存在胺或者铵离子
检查洗涤剂兼容性数据
避免使用BCA法/Lowry法和胺衍生化方法
检查与BCA/Lowry法和Bradford法的兼容性
这种蛋白质是否无翻译后修饰,如糖基化
是否有一个可供参照的标准蛋白质(匹配蛋白质)
开始:已知纯度的蛋白质样品
避免使用BCA和Lowry法
避免使用紫外线280 nm吸收法和Bradford法
所描述的任何检测方法都将可用,其选择应考虑具体标准和现有可用设备
糖基化蛋白避免使用Bradford法和Lowry法
是否存在来自蛋白沉淀步骤的高浓度的盐或酸
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